在肝脏相关研究中研究人员经常需要解决一个问题应该选择哪种AAV血清型进行肝脏递送虽然AAV5、AAV9、AAV-DJ等血清型均可感染肝脏组织但从目前公开发表的研究和实际应用情况来看AAV8仍然是肝脏研究中最常使用的血清型之一。那么AAV8为什么受到广泛应用又适用于哪些肝脏研究场景本文结合近年来肝脏相关研究案例进行介绍。为什么AAV8成为肝脏研究的常用选择根据文献报道多种AAV血清型均可转导小鼠肝脏包括AAV8AAV9AAV5AAV3AAV-DJAAVhu.37AAVrh.8其中AAV8在小鼠肝脏中的转导效率较高并能够实现较长时间的稳定表达因此被广泛应用于肝脏相关研究。对于需要快速、高效表达的实验还可采用scAAV8进一步提高表达效率。AAV8在肝细胞研究中的应用肝细胞是肝脏最主要的实质细胞也是许多肝病研究的重要靶细胞。在实际应用中研究人员通常将AAV8与肝细胞特异性启动子TBG或Alb联合使用实现目的基因在肝细胞中的表达。MASLD研究案例武汉大学团队在研究产前泼尼松暴露导致的MASLD易感性时利用AAV8结合TBG启动子在小鼠肝脏中特异性过表达Serpina3c。结果显示肝脏特异性表达Serpina3c后可显著减轻肝脏病理损伤并降低MASLD发生风险。HCC研究案例在肝细胞癌研究中广东省人民医院团队利用AAV8-TBG系统敲低肝细胞中的AKR1D1表达。研究发现AKR1D1缺失会导致肠道菌群代谢改变并促进肝癌进展。糖代谢研究案例上海交通大学医学院附属瑞金医院团队利用AAV8-TBG-Cre实现肝脏特异性Crebbp/Ep300敲低。实验结果表明肝脏CBP/p300缺失会显著影响氨基酸驱动的糖异生过程。AAV8不仅适用于肝细胞除了肝细胞之外AAV8还可结合不同启动子实现肝脏其他细胞类型的靶向。例如肝星状细胞研究肝纤维化的重要特征之一是肝星状细胞活化。温州医科大学团队利用AAV8-GFAP-sh-csnk2a1特异性敲低肝星状细胞中的CK2α。结果显示抑制CK2α后可减轻胶原沉积并改善肝纤维化。这表明AAV8不仅可用于肝细胞研究也可通过细胞特异性启动子实现肝脏非实质细胞的精准调控。肝脏研究中AAV8通常如何给药从上述研究可以发现AAV8最常见的递送方式为尾静脉注射。公开案例中的常见剂量包括1×10⁹ VG2×10¹¹ VG具体剂量需根据实验目的、载体设计以及靶细胞类型进行优化。结论对于肝脏研究而言多种AAV血清型均具有应用价值但AAV8凭借较高的肝脏转导效率和稳定表达能力已成为MASLD、HCC、糖代谢异常以及肝纤维化等研究中广泛采用的递送工具。同时通过与TBG、Alb或GFAP等不同启动子组合AAV8不仅能够实现肝细胞靶向表达也能够用于肝星状细胞等特定细胞群体的研究。
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