在流式细胞术Flow Cytometry, FCM、免疫荧光成像、微球阵列技术、体外诊断等多种领域中荧光染料是实现细胞标记和信号检测的核心工具。其中PE藻红蛋白、APC别藻蓝蛋白、及 PerCP多甲藻黄素-叶绿素蛋白复合物是常用的荧光染料主要用于偶联抗体实现对细胞表面或胞内分子的特异性检测或定位。R-藻红蛋白R-Phycoerythrin,R-PER-PE 是流式细胞术中最经典、应用最广泛的荧光染料之一属于藻胆蛋白Phycobiliprotein 家族其主要的天然来源是红藻。R-PE具有极高的荧光亮度和光稳定性。天然PE来源与结构天然提取主要来自海洋红藻如Porphyridium cruentum核心结构是由 α、β、γ 三个亚基组成的球状蛋白每个亚基结合多个藻红素Bilin发色团主要是藻红胆素 PEB 和藻尿胆素 PUB这些发色团是其强荧光的核心来源。光谱特性激发波长Excitation主要激发光为488 nm和 561 nm适配流式细胞术最常见的激发光源发射波长Emission最大发射峰约576nm橙黄色荧光信号可被流式细胞仪的 575/26 nm 等滤光片捕获。PE活化天然 PE缺乏能与抗体发生稳定共价结合的活性基团如氨基、羧基、巯基等无法直接与抗体偶联需通过化学修饰引入活性基团从而实现稳定偶联。具体过程可分为两步第一步PE 活化引入活性位点利用化学试剂如 NHS 酯、马来酰亚胺对 PE 进行修饰◦若用NHS 酯修饰会在 PE 的赖氨酸残基上引入 “NHS 活性酯基团”该基团可与抗体赖氨酸的氨基-NH2发生酰胺化反应形成稳定的酰胺键◦若用马来酰亚胺修饰会在 PE 上引入 “马来酰亚胺基团”该基团可与抗体还原后暴露的巯基-SH发生硫醚化反应偶联位点更特异避免影响抗体的抗原结合位点。第二步活化 PE 与抗体偶联活化后的 PE如 NHS-PE、Maleimide-PE可与抗体在特定条件如 pH 7.2-7.4、室温孵育 1-2 小时下反应通过共价键形成 “PE - 抗体偶联物”且偶联后 PE 的荧光亮度和光谱特性不受影响。性能优势荧光亮度极高比传统小分子染料如 FITC亮 20-30 倍适合检测低表达抗原如某些细胞因子受体、少量表达的表面分子光稳定性强不易发生光漂白可长时间检测或用于高功率激光下的实验水溶性好与抗体偶联后不易聚集保证标记效率和检测重复性。主要应用PE 是流式实验中的 “通用型染料”几乎覆盖所有需要高亮度标记的场景基础细胞表型分析最常用于标记免疫细胞表面分子如 T 细胞CD3-PE、B 细胞CD19-PE、NK 细胞CD56-PE等尤其适合低表达抗原如 CD25、CD127的检测多色流式实验因激发波长兼容 488 nm、发射不与 FITC525 nm/PerCP675 nm重叠常作为多色 panel如 4-6 色中的 “中亮度通道”与 FITC低亮度、APC高亮度搭配使用功能细胞检测如细胞凋亡Annexin V-PE、细胞增殖CFSE 与 PE 通道区分、细胞因子IFN-γ-PE等临床诊断用于白血病 / 淋巴瘤免疫分型、免疫功能评估如 T 细胞亚群 CD4-PE/CD8-PE。鸿藻生技homealgALG - 专业藻类荧光素研发生产品牌https://www.homealgae.com.cn/ 主产品「天然荧光标记蛋白」为现代生物医学研究及临床领域如细胞观测、细胞分选例循环肿瘤细胞检测 (CTC)、细胞治疗所不可或缺的试剂其次公司所生产之藻类萃取原料完成国际化妆品命名协会 (INCI) 登录经工研院原料安全及功效测试报告支持为美妆保养、保健营养品产业中越渐热门的配方选择。公司现为台湾抗体协会、英国 Pivotal Scientific Limited PSL Alliance 生技联盟成员。主要提供Purified R-Phycoerythrin (R-PE) (Cat#HA201)Activated R-Phycoerythrin (ActivatedR-PE) (Cat#HA202)Purified Allophycocyanin (APC) (Cat#HA203)Crosslinked Allophycocyanin (CL-APC) (Cat#HA204E)Peridinin-Chlorophyll-protein (PerCP) (Cat#HA206)
