Q1. 抗体如何保存A1. 参见说明书[ STORAGE AND STABILITY ]不同的抗体产品保存方式也会存在差别。1大多数抗体产品保存方法如下图分装-20°C冻存有效期为24个月。2荧光素标记抗体保存方法以LAC101Hu41PE-Linked Polyclonal Antibody to Integrin Beta 8 (ITGb8)为例需4°C避光保存有效期为12个月。Q2. 抗体的浓度是多少A2. 参见说明书[ PROPERTIES ]中的“Concentration”。Q3. 多克隆抗体所识别的抗原表位是哪一段序列A3. 多克隆抗体是由多个B细胞克隆产生的抗体混合物能够识别同一抗原免疫原的多个不同表位即抗原决定簇。以PAB094Mu01Polyclonal Antibody to Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1)为例其免疫原见下图。Q4. 单克隆抗体抗原表位是哪一段序列A4. 对于单克隆抗体目前没有检测过抗原表位。表位是一个仅包含约8至10个氨基酸的小片段通常抗原免疫原有多个表位。只有当免疫原是肽时表位才会很容易确定。然而云克隆使用重组蛋白作为免疫原来制备抗体当免疫原是一种含有多个表位的蛋白时抗体识别表位的鉴定对大多数生物公司来说是一项艰巨的任务。所以针对单克隆抗体我们能确定的是免疫原序列见说明书但不能确定所识别的单一表位。Q5. 云克隆可以提供标记抗体吗A5. 云克隆研发的所有抗体产品都可以通过偶联生产各种标记抗体包括Biotin、HRP以及约20种荧光素如FITC、APC、PE、PerCP、Cy系列以及AF系列等。Q6. 抗体产品是否适用于说明书中未列出的应用A6. 对于未列出的应用目前暂时未验证。客户可对应用进行扩展并分享给我们数据我们可以提供奖励。Q7. 抗体的缓冲液可以更换吗A7. 抗体的缓冲液是经过验证后优选的缓冲体系。如果客户的实验对于缓冲液有特别要求抗体的缓冲液可以更换。除了产品页面上显示的原始缓冲液外云克隆还接受定制配方不含甘油、不含防腐剂等。请联系云克隆销售团队/您当地的经销商告知您的需求即可获取解决方案。Q8. 当同一靶标物有多种抗体选择时哪一种最适合我的应用A8. 通常针对一种靶标物云克隆可提供不止一种抗体产品。建议选用您所需的应用中表现最佳的抗体可以参考产品说明书中验证过的实验结果图。如仍需帮助请联系云克隆技术支持以助您选择适合实验应用的最佳抗体。Q9. WB实验条带为什么与文献/蛋白分子量不一致A9. WB实验验证的样本包括重组蛋白和天然样本。当样本是重组蛋白片段时分子量与天然蛋白会存在差异因而条带大小不同。但是这不影响抗体识别天然样本当使用天然样本进行WB实验时将会获得与天然蛋白分子量一致的条带。以MAA909Hu22Monoclonal Antibody to Ceruloplasmin (CP)为例。下图A检测样本为重组人Ceruloplasmin蛋白片段 (Asp789~Gly1065 with N-terminal His Tag)其分子量为33KDa所以WB条带在33KDa。下图B检测样本为天然样本人血清人Ceruloplasmin蛋白由1065个氨基酸组成预测分子量为122KDa且天然蛋白可能经历表达后修饰如糖基化、磷酸化、泛素化等所以WB条带出现在140KDa。Q10. 如何选择第二抗体A10. 选择第二抗体二抗是免疫实验如Western Blot、ELISA、IF等中的关键步骤正确选择二抗能显著提高实验的特异性和信号强度。选择二抗主要考虑以下因素1一抗的种属来源和类型如果一抗是来源于兔则选用抗兔IgG例如羊抗兔豚鼠抗兔IgG等。如果一抗是来源于小鼠则选用抗小鼠IgG例如羊抗小鼠兔抗小鼠IgG等。2根据实验选择二抗标记物二抗的标记物包括酶、生物素和荧光素等。标记物的选择取决于实验的类型。WB 和 IHC通常选用酶标二抗而IF检测中常使用荧光素标记二抗。Q11. 云克隆可以提供抗体产品定制服务吗A11. 云克隆可以为客户提供抗体产品定制服务客户也可以根据自身的需求灵活地选择服务项目或个性化的定制服务。基于公司自建的完善的技术平台可提供多克隆抗体制备和单克隆抗体制备定制服务。1)多克隆抗体的定制流程抗原→免疫动物→抗血清获取→抗体纯化2)单克隆抗体的定制流程抗原→免疫动物→细胞融合和筛选 →腹水制备/细胞培养表达抗体→抗体纯化3)定制服务特色① 拥有专业从事动物饲养和动物实验的动物公司动物死亡率1%。② 拥有多种实验动物可供选择。③ 自主研发有高分子完全佐剂和不完全佐剂其免疫效果是弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂的2-3倍。④ 纳米乳化技术。⑤ Easy-Fusion技术快速高效制备杂交瘤细胞。⑥ 提供Protein AProtein G抗原亲和纯化等多种纯化方式。⑦ 提供抗体标记服务包括HRP、Biotin以及多种荧光素等。⑧ 提供Western-blot、ICC/IHC、IP、FACS等多种检测方式。Q12. 如何从抗体产品说明书中获取有效信息A12. 客户咨询的很多问题都能在产品说明书中找到如抗体的来源、宿主、纯化方法、浓度、规格、物种交叉、免疫原、适用的实验以及推荐的抗体工作浓度、抗体buffer、抗体保存方法以及抗体验证结果图。如果已有产品不能满足客户需求请联系云克隆技术支持以确认是否可以按客户需求制备产品。
